La técnica ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) es una de las herramientas más potentes del laboratorio clínico moderno. Gracias a ella, podemos detectar infecciones, hormonas, anticuerpos, antígenos y marcadores tumorales con alta sensibilidad y especificidad.
Si estudias Técnico de Laboratorio, Biología o simplemente te apasiona el mundo del análisis clínico, este artículo te enseñará qué es ELISA, cómo funciona paso a paso y por qué sigue siendo una de las técnicas más utilizadas en todo el mundo.
🧬 ¿Qué es la técnica ELISA?
Es un inmunoensayo enzimático que utiliza anticuerpos unidos a una enzima para detectar la presencia de una sustancia específica (antígeno o anticuerpo) en una muestra biológica (sangre, suero, saliva, etc.).
🧠 Principio básico:
- El anticuerpo se une a su antígeno específico.
- Una enzima unida al anticuerpo genera una reacción visible (color).
- Cuanto más intenso el color, mayor es la concentración del analito.
🔍 ¿Para qué se utiliza ELISA?
- 🦠 Detección de infecciones (VIH, hepatitis, COVID-19, dengue…)
- 🧪 Medición de hormonas (TSH, insulina, hCG, cortisol)
- 🧫 Identificación de marcadores tumorales (CEA, AFP, CA125…)
- 💊 Monitorización de fármacos y drogas terapéuticas
- 🔬 Diagnóstico de enfermedades autoinmunes
🔬 Tipos de ELISA
Existen varios formatos, cada uno adaptado a un tipo de muestra o marcador. Los principales son:
1. ELISA directo
- Se detecta un antígeno con un anticuerpo marcado con enzima.
- Rápido, pero menos sensible.
2. ELISA indirecto
- Detecta anticuerpos en la muestra (ej. VIH).
- Usa un segundo anticuerpo con enzima → mayor sensibilidad.
3. ELISA tipo sándwich
- El antígeno queda atrapado entre dos anticuerpos.
- Muy específico y usado para detectar hormonas o antígenos.
4. ELISA competitivo
- Útil cuando el analito es muy pequeño.
- Cuanto más antígeno hay, menos color se genera (relación inversa).
🧪 ELISA paso a paso
1. Preparación de la placa
- Los pocillos de la placa ELISA se recubren con el antígeno o anticuerpo.
2. Adición de la muestra
- Se añade suero u otro fluido biológico al pocillo.
3. Lavado
- Se eliminan sustancias no unidas para evitar interferencias.
4. Adición del anticuerpo conjugado con enzima
- Este se unirá solo si el analito objetivo está presente.
5. Sustrato enzimático
- Se añade una sustancia que cambia de color si hay unión.
6. Lectura
- Se mide la intensidad del color con un lector ELISA (espectrofotómetro).
- El color es proporcional a la cantidad del analito.
📈 ¿Qué resultados se obtienen?
- Se puede obtener un resultado cualitativo (positivo o negativo) o cuantitativo (concentración exacta).
- Es muy útil para cribados masivos, diagnóstico precoz y control terapéutico.
🧠 ¿Qué debe saber un estudiante?
- Cómo interpretar un gráfico de absorbancia
- Cómo preparar los reactivos correctamente
- Por qué es vital el control de calidad en cada ensayo
- Diferencias entre los tipos de ELISA y cuándo usar cada uno
📌 En resumen
- ELISA es una técnica inmunológica altamente sensible y específica.
- Se basa en la reacción antígeno-anticuerpo + una enzima que produce una señal visible.
- Tiene múltiples formatos (directo, indirecto, sándwich, competitivo).
- Es usada a diario en diagnóstico clínico, investigación y farmacología.
🎯 En próximos artículos profundizaremos en cómo se interpretan los resultados de un ELISA, qué errores evitar y cómo se comparan con otras técnicas como la inmunocromatografía o la inmunofluorescencia.
